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體外哺乳動物細(xì)胞基因突變試驗儀

瀏覽次數(shù):187更新日期:2025-05-06
  體外哺乳動物細(xì)胞基因突變試驗儀
 
  一、 儀器介紹
 
  實驗?zāi)康模?/strong>
 
  本試驗用于檢測受試物對體外培養(yǎng)的哺乳動物細(xì)胞的基因突變作用,包括堿基對突變、移碼突變和缺失等,從而評價受試物引起突變的可能性
 
  應(yīng)用范圍
 
  應(yīng)用于科研、農(nóng)業(yè)、衛(wèi)生、教育、霧霾狀態(tài)可吸入顆粒染毒效果研究等各個領(lǐng)域
 
  符合標(biāo)準(zhǔn):
 
  GB/T 15670.20-2017《農(nóng)藥登記毒理學(xué)試驗方法第20部分:體外哺乳動物細(xì)胞基因突變試驗》
 
  二、試驗流程
 
  1)細(xì)胞培養(yǎng):
 
  選擇合適細(xì)胞系(如L5178Y、CHO),常規(guī)傳代培養(yǎng)
 
  2)受試物處理:
 
  暴露于不同濃度受試物(需設(shè)陰性/陽性對照)
 
  3)表達(dá)期:
 
  預(yù)留足夠時間(通常7-10天)使突變表型顯現(xiàn)。
 
  4.)突變體篩選:
 
  TK試驗:使用篩選TK突變體。
 
  HPRT試驗:選HPRT突變體。
 
  5)克隆形成分析:
 
  計數(shù)突變集落,計算突變頻率(突變集落數(shù)/存活細(xì)胞數(shù))
 
  6)數(shù)據(jù)統(tǒng)計:
 
  與對照組比較,判斷突變率是否顯著增加。
 
  三、注意事項
 
  1)細(xì)胞活力控制:受試物濃度需保證細(xì)胞存活率(通常>50%)
 
  2)代謝活化系統(tǒng):需加入S9混合物(模擬體內(nèi)代謝,(如Aroclor 1254誘導(dǎo)的大鼠肝S9)。
 
  3)假陽性/陰性:避免pH、滲透壓等非特異性因素干擾。
 
  4)合規(guī)性:  遵循國際指南(如OECD 490、ICH S2R1)。
 
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